俗话说，巧妇难为无米之炊。再精妙的技术，缺乏“原材料”也举步维艰。在生物制药领域，难表达蛋白就是这样一个“天生反骨的存在”，由于它的产量低，很多独具潜力的分子止步于早研阶段。汉腾生物开发了针对难表达蛋白（Difficult to express protein）的DTEasy工具箱，全面解决难表达蛋白的痛点，助力生物制药产业突破瓶颈，气决泉达。
在生物制药领域，表达和生产一些难表达的蛋白质，如部分单克隆抗体、细胞因子、血液因子、酶、膜蛋白以及复杂结构改造抗体等，一直是个巨大的挑战。
难表达蛋白产量低的原因
1、难折叠、结构不稳定或高疏水性
对于以下几种类型：
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分子量过大、富含二硫键的蛋白复合物
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需要复杂糖基化修饰的蛋白
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膜蛋白、金属蛋白、部分细胞因子等疏水性较高或需要特定配体来稳定其结构的蛋白
常常难以正确折叠或保持稳态结构，容易在细胞内形成聚集物，引发蛋白降解及细胞凋亡。
单抗中也有部分亚类产量较低（低于1g/L），主要由于抗体的重链和轻链的种系或互补决定区的序列问题，导致复合物不能有效组装，形成错误折叠或聚集。
2、细胞毒性
蛋白酶和凝血酶的毒性功能在过表达时引发细胞凋亡，导致难以重组表达。
由于难表达蛋白质产量受限，很多独具潜力的分子由于可开发性限制止步于早研阶段，非常可惜！
为解决生物制药产业长期以来的“沉疴宿疾”，汉腾生物开发了DTEasy难表达蛋白平台，通过集成并优化表达过程中的各个关键阶段，成功提高难表达蛋白的产量。
汉腾生物 DTEasy工具箱
复合策略系统解决难表达蛋白的痛点
汉腾生物开发了针对难表达蛋白（Difficult to express protein）的DTEasy工具箱，通过分子改良、专有载体、优选宿主细胞系以及定制化工艺，全面提升难表达蛋白产量。
1
分子改良：
改造序列，提升蛋白稳定性
基于序列分析和蛋白结构预测，通过引入突变或优化氨基酸序列，改善蛋白的三维结构，提高其热稳定性。
在项目中，我们通过序列风险分析和点突变，成功将细胞池产量提高到原来的7.6倍，且未引起活性改变。
▲来源：汉腾生物内部研究数据
2
专有载体：
优化载体，提高蛋白合成效率
通过转录组差异表达分析，将与难表达蛋白产量正相关的顺式作用元件插入到载体中，对不同类型重组蛋白有100%-400%产量提升。
▲来源：汉腾生物内部研究数据
3
最佳宿主细胞系选择：
挑选适配宿主，实现高效表达
汉腾独家GlycoExpress人类髓系来源细胞系，专门用于表达困难的糖蛋白。在GPCR类、血液因子、复杂多聚物等重组蛋白表达中，具有更高的产量和与人类天然蛋白更相似的糖谱。
▲来源：汉腾生物内部研究数据
4
定制化工艺：
专有添加剂，最高实现产量3倍提升
对于培养过程中对细胞产生一定压力的蛋白，通过添加剂增加细胞耐受也可以提升表达量。DTEasy专有添加剂可只需在培养过程中简单的单次添加，即可最高提升3倍表达量。
▲来源：汉腾生物内部研究数据
综上，汉腾DTEasy平台通过分子设计、载体优化、优选宿主细胞系以及定制工艺，多管齐下，解决不同类型蛋白的难表达问题。可帮助客户释放高价值但传统上难以表达的蛋白质的生产潜力，加快开发进度，提供设计选择的灵活性，并最终扩大患者获得创新生物制品的机会。